Rientrando nella E 45, o seguendo la suggestiva strada interna che costeggia il lago, passata la città di Passignano sul Trasimeno, si giunge a Tuoro. Il centro sorge sul territorio che fece da scenario alla "Battaglia del Trasimeno", dove l'esercito romano fu pesantemente sconfitto da quello punico comandato da Annibale, nel 217 a. C. All'evento storico è dedicato un "Centro di Documentazione permanente" che organizza vari itinerari di interesse archeologico e paesaggistico, tra i luoghi della Battaglia.
Presso Punta Navaccia, al lido di Tuoro invece, è l'arte contemporanea a far da protagonista con un originale museo all'aperto: II Campo del Sole. Si tratta di un insieme architettonico costituito da 28 colonne/sculture di pietra serena, estratta nelle cave locali, eseguite da alcuni tra i più importanti artisti italiani e stranieri.
Da Tuoro è anche possibile imbarcarsi e raggiungere l'Isola Maggiore, una delle tre isole del Trasimeno, dove anche San Francesco di Assisi sembra essere giunto nel 1211.
Un percorso museale svelerà al visitatore i gioielli dell'isola, come la bella Chiesa di San Michele Arcangelo, risalente all'XI sec, con interessanti affreschi di scuola umbra.

Lasciata Tuoro il nostro itinerario continua alla volta di Castiglione del Lago. Fondata come centro etrusco dalla vicina Chiusi e poi abitata dai Romani, Castiglione rappresentò nel VII sec. d. C. per la Tuscia Longobarda, un importante confine difensivo contro la Perugia bizantina. Nel 1550 poi, papa Giulio III donò il paese a sua sorella Jacoma ed ai nipoti Ascanio e Fulvio della Corgna, che vi regnarono, come Duchi di Castiglione del Lago, fino al 1647.
Nella piazza principale della città sorge il Palazzo della Corgna, eseguito su progetto di Galeazzo Alessi, noto architetto perugino. Il palazzo, in pietra calcarea e cotto, vede i suoi interni riccamente decorati: oltre agli affreschi celebranti le imprese d'armi di Ascanio della Corgna, notevole è il ciclo manierista di Niccolo Circignani, detto il Pomarancio. Il palazzo Ducale è vicino, anzi collegato da un camminamento coperto, alla Rocca dei Leoni. La fortezza (1247), uno dei più importanti esempi di architettura militare umbra, fu costruita al tempo in cui la città venne conquistata da Federico II di Svevia. L'edificio a forma pentagonale con quattro torri angolari, è collocato su uno sperone calcareo che permette di dominare tutto il Trasimeno.
Oltrepassata Castiglione del Lago ci si addentra in mezzo alle dolci colline che si aprono, da un lato, sulla distesa d'acqua del Trasimeno e, dall'altro, sulla Valdichiana. Si percorrerà, dunque, la strada che da Città della Pieve arriva a Panicale, passando per Paciano.

La notorietà del paese di Città della Pieve è legata al suo figlio più illustre, Pietro Vannucci detto il Perugino, cui diede i natali nel 1448. Numerose sono le testimonianze artistiche del pittore presenti nella città: la bellissima Adorazione dei Magi (1504) della Chiesa di Santa Maria dei Bianchi e la Deposizione dalla Croce (1517) di Santa Maria dei Servi.
Città della Pieve nasce intorno al VII sec. d.C., come postazione fortificata del Ducato Longobardo di Chiusi. NelI'VIII sec. viene edificata una Pieve (chiesa con funzioni battesimali), dedicata ai Santi Protasio e Gervasio, ora Cattedrale della città; qui, oltre ad alcune tele del Perugino, troviamo un bel Crocifisso del Giambologna ed alcuni dipinti di Pomarancio. Attribuibili quasi certamente alla mano del Pomarancio sono anche alcuni degli affreschi di Palazzo Della Corgna, la più importante tra le dimore signorili della città.
A testimonianza del carattere poco arrendevole dei pievesi resta invece, la Rocca, fatta costruire nel 1326 da Perugia, per meglio controllare l'intera città e rendere sicura la propria guarnigione. La costruzione, posta in corrispondenza delle cinta murarie, sembra essere opera dei senesi Ambrogio e Lorenzo Maitani, architetto, quest'ultimo della facciata del Duomo di Orvieto.
Il nostro itinerario termina a Panicale , borgo medioevale, ancora in gran parte intatto nel suo aspetto originario, che deriva il suo nome da "Pani calet", che significa “sta a cuore al dio Pan (protettore della natura e delle selve)”.